離子色譜柱管內(nèi)填有顆粒大小均勻的固定相，一般商品化離子色譜柱填料主要用5~15μm顆粒的高分子聚合物小球，特定場(chǎng)合下也采用無(wú)機(jī)氧化物（如硅膠）顆粒；

目前離子色譜柱所用填料的顆粒主要為球形，而針對(duì)填料表面結(jié)構(gòu)性質(zhì)（孔隙的大小），填料可以分離微孔型、大孔型和超孔型，隨著離子色譜應(yīng)用于復(fù)雜樣品越來(lái)越多，對(duì)離子色譜柱的交換容量要求也越來(lái)越高，超孔型填料也是離子色譜的一個(gè)發(fā)展趨勢(shì)。

陰離子色譜柱操作注意事項(xiàng)

(1)必須在色譜柱的流路管線**充滿淋洗液后才能將色譜柱連接到色譜儀上。

(2)按色譜柱上標(biāo)識(shí)的流路方向連接色譜柱。

(3)淋洗液中可添加適量的有機(jī)溶劑進(jìn)行改性(低于50%乙腈或甲醇等)。

(4)推薦使用溫度是35C，建議配備柱溫箱使用。溫度與各離子的洗脫時(shí)間有**相關(guān)性，溫度改變，離子的洗脫時(shí)間會(huì)有所變化。

(5)開(kāi)泵后保持流量低于0.5mLUmin，之后逐漸增加流量至工作流量。

(6)含有有機(jī)物和雜質(zhì)的樣品，請(qǐng)先對(duì)樣品進(jìn)行前處理后再進(jìn)樣分析。

陰離子色譜柱特點(diǎn)

陰離子色譜柱是款高容量，**，疏水性陰離子交換色譜柱。用于分離大范圍價(jià)態(tài)陰離子，包括多磷酸鹽,聚磷酸酯,和其他多價(jià)的復(fù)雜試劑如EDTA和NTA。

使用的多磷酸鹽，和螯合劑在復(fù)雜樣品矩陣。

硫化物確定使用氫氧化鈉和廢水樣品安培檢測(cè)。

分析使用的六價(jià)鉻柱后反應(yīng)和環(huán)境介質(zhì)吸收可見(jiàn)光檢測(cè)，包括廢水鉻，飲用水和空氣。

獨(dú)立的無(wú)機(jī)和有機(jī)種飲用水中砷和尿液樣本。

高容量，更高分辨率。

需要更長(zhǎng)的保留時(shí)間，但是分離度更高。

促進(jìn)良好表征樣品中有機(jī)酸和陰離子的快速分析。

特別適合分離復(fù)雜樣品基質(zhì)或未表征樣品中的有機(jī)酸和陰離子。

建議用于一價(jià)和二價(jià)有機(jī)酸。

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相關(guān)熱詞：

等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,**液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓**器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀**材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。

當(dāng)色譜柱使用一段時(shí)間以后，柱內(nèi)由于各種原因，滯留了一些高沸點(diǎn)組分或氧化物等，除柱效有所下降外，還可能出現(xiàn)基線波動(dòng)或“鬼峰”。為了去除污染物，使柱效和基線恢復(fù)到原來(lái)的狀態(tài)，稱為色譜柱的再生。色譜柱的再生和柱老化有**區(qū)別和不同，它是柱在使用一段時(shí)間柱性能下降，經(jīng)處理后盡量恢復(fù)到原來(lái)性能的過(guò)程。A、色譜柱在以下幾種情況必須再生處理a.使一段時(shí)間，柱效明顯下降；b.柱被污染，特別是在程序升溫時(shí)，基線漂移和噪聲超過(guò)容忍程度或出現(xiàn)“鬼峰”；c.柱頭塌陷，柱床短路或斷位(在玻璃柱中容易發(fā)現(xiàn))，而出現(xiàn)尖峰或雙重峰；d.峰形展寬，保留時(shí)間明顯變化；e.待分離組分和固定相表面非特異性相互作用，引起保留時(shí)間較短的峰拖尾或出現(xiàn)雙峰；B、毛細(xì)管柱再生的幾種方法a.用載氣將色譜柱污染物沖洗出來(lái)；b.將柱頭截去100mm 或更長(zhǎng)一些；c.若使用交聯(lián)的色譜柱，可在儀器上反復(fù)注射溶劑進(jìn)行沖洗。常用的溶劑依次為丙酮、甲苯、乙醇、氯仿和二氯甲烷，每次可進(jìn)樣5～10μL；d.交聯(lián)柱在儀器上沖洗無(wú)效時(shí)，可把柱拆下來(lái)用二氯甲烷或氯仿沖洗，溶劑用量視柱的污染程度而定，一般20mL 左右。C、色譜柱再生前應(yīng)注意的問(wèn)題當(dāng)分析出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)，不能只考慮是柱問(wèn)題，而馬上進(jìn)行再生。除上述情況外，還應(yīng)考慮樣品處理、進(jìn)樣技術(shù)、操作有無(wú)失誤、數(shù)據(jù)處理參數(shù)有無(wú)改變等可能帶來(lái)的問(wèn)題。a.襯管、預(yù)柱和檢測(cè)器被污染也會(huì)引起基線不穩(wěn)定、出現(xiàn)“鬼峰”或裂解峰；b.新的注射墊也會(huì)引起基線漂移和出現(xiàn)“鬼峰”；c.襯管密封欠佳、柱安裝死體積或檢測(cè)器固有特性也會(huì)引起較早出現(xiàn)峰的拖尾；d.分析系統(tǒng)發(fā)生變化(如漏氣嚴(yán)重)也可能使保留時(shí)間突變；e.峰變寬，除柱效下降外也可能由柱外效應(yīng)引起；f.進(jìn)樣量太大也會(huì)引起峰變寬、拖尾或保留時(shí)間變短；g.色譜柱長(zhǎng)時(shí)間樣品過(guò)載，保留時(shí)間也會(huì)變小等。D、色譜柱再生時(shí)應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題1.如前所述和色譜柱老化一樣，不是溫度越高越好，時(shí)間越長(zhǎng)越好；建議不要使用長(zhǎng)時(shí)間烘烤的方法，來(lái)處理受到污染的色譜柱，因?yàn)楹婵緯r(shí)，溫度會(huì)把污染的殘留物變成不能溶解的物質(zhì)，再用溶劑清洗也無(wú)濟(jì)于事；2.儀器在高靈敏度操作時(shí)，如：量程在1×10-11A/mV以下，痕量分析程序升溫過(guò)程中，溫度升到大于180℃后，基線明顯漂移是不可避免的；3.不同類型柱子，再生方法不同；4.樣品種類、組分、進(jìn)樣量不同或操作時(shí)間長(zhǎng)短不同，再生方法也不同；5.儀器本身?xiàng)l件如：氣源種類、純度、凈化條件、進(jìn)樣口結(jié)構(gòu)和操作檢測(cè)器不同，再生柱方法也有區(qū)別；6.高分子量組分污染色譜柱后，高溫再生時(shí)間長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致固定相的老化；使用交聯(lián)或鍵合柱***好用溶劑漂洗再生，漂洗溶劑流動(dòng)方向**要從柱出口注入。應(yīng)該注意，毛細(xì)管柱交聯(lián)鍵合率通常不到90%，因此會(huì)漂洗掉未化學(xué)結(jié)合的液相部分，所以保留時(shí)間和分離狀態(tài)會(huì)有所變化；7.對(duì)于難揮發(fā)物，碳化物是不能通過(guò)再生除去，對(duì)于填充柱***好使用帶襯管氣化室進(jìn)樣器，對(duì)于毛細(xì)管可通過(guò)把柱入口切去30～50cm的方法除去污物段。有條件的可以使用預(yù)柱，把不揮發(fā)的有機(jī)物、無(wú)機(jī)物和顆粒材料阻留在預(yù)柱中，需要時(shí)更換預(yù)柱；8.在某些情況下，色譜柱要在溫度極限附近使用，這時(shí)基線漂移和大噪聲已不可避免，柱的再生要求只能視情況而定；9.不是所有色譜柱通過(guò)再生均能恢復(fù)原來(lái)性能。

色譜柱的柱效下降會(huì)有什么現(xiàn)象?

　　柱效(columnefficiency)，是指色譜柱保留某一化合物而不使其擴(kuò)散的能力。柱效能是一支色譜柱得到窄譜帶和改善分離的相對(duì)能力。

　　柱效，從名字上理解是色譜柱的分離效果。色譜柱的有效塔板數(shù)越大或有效的塔板高度越低，色譜柱的柱效越好，類似于每個(gè)塔板的分離效率相同，有效塔板數(shù)越多，***終得到的物質(zhì)越純。

　　柱效率是指溶質(zhì)通過(guò)色譜柱之后其區(qū)域?qū)挾仍黾恿硕嗌?，它與溶質(zhì)在兩相中的擴(kuò)散及傳質(zhì)情況有關(guān)，這是所謂色譜的動(dòng)力學(xué)過(guò)程。

　　怎么計(jì)算和直觀的提現(xiàn)?

　　從塔板概念評(píng)價(jià)柱效

　　根據(jù)塔板理論，可以計(jì)算一根色譜柱所達(dá)到的理論塔板數(shù)，或表達(dá)為每米理論塔板數(shù)n/m。把相當(dāng)于一個(gè)理論塔板的柱子長(zhǎng)度稱作理論塔板高度H，通常采用有效塔板數(shù)N和有效塔板高度L來(lái)表達(dá)柱效，W為峰寬,W1/2為半峰寬：

　　N=16(Tr/W)^2

　　=5.54(Tr/W(1/2))^2

　　=L/H

　　顯然，N值越大，或H值越小，柱效越高。分散效果主要取決于所選擇的固定相。

　　從柱的算公式上我們可以看出柱效主要跟理論塔板數(shù)和柱長(zhǎng)有關(guān)系。我們來(lái)解釋一下理論塔板數(shù)。

　　理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber)，N是色譜柱效的參數(shù)之一,用于定量表示色譜柱的分離效率(簡(jiǎn)稱柱效)。N取決于固定相的種類、性質(zhì)(粒度、粒徑分布等)、填充狀況、柱長(zhǎng)、流動(dòng)相的種類和流速及測(cè)定柱效所用物質(zhì)的性質(zhì)。如果峰形對(duì)稱并符合正態(tài)分布，N可近似表示為：

　　理論塔板數(shù)=5.54(保留時(shí)間/半高峰寬)2(2是平方)

　　柱效率用理論塔板數(shù)定量地表示：N=16*(t/w)2。其中，t是溶質(zhì)從進(jìn)樣到**洗脫峰出現(xiàn)的時(shí)間，w為該溶質(zhì)的洗脫峰在基線處的寬度。在一色譜柱中用相同的洗脫條件時(shí)候，不同化合物的滯留時(shí)間與其洗脫峰寬度之比接近常數(shù)。因此理論塔板數(shù)大的色譜柱效率高。當(dāng)然，N的大小和柱子長(zhǎng)度有密切關(guān)系：理論塔板高度H=柱長(zhǎng)/N，用H可以衡量單位長(zhǎng)度的色譜柱的效率，H越小，則色譜柱效率越高。。。N為常量時(shí)，W隨tR成正比例變化。在一張多組分色譜圖上，如果各組份含量相當(dāng)，則后洗脫的峰比前面的峰要逐漸加寬，峰高則逐漸降低。

　　用半峰寬計(jì)算理論塔板數(shù)比用峰寬計(jì)算更為方便和常用，因?yàn)榘敕鍖捀菀诇?zhǔn)確測(cè)定，尤其是對(duì)稍有拖尾的峰。

　　N與柱長(zhǎng)成正比，柱越長(zhǎng)，N越大。用N表示柱效時(shí)應(yīng)注明柱長(zhǎng)，，如果未注明，則表示柱長(zhǎng)為1米時(shí)的理論塔板數(shù)。(一般HPLC柱的N在1000以上。)若用調(diào)整保留時(shí)間(tR’)計(jì)算理論塔板數(shù)，所得值稱為有效理論塔板數(shù)(N有效或Neff)=16(tR’/W)

　　離子色譜柱的柱效一般由硫酸根的理論塔板數(shù)來(lái)計(jì)，理論塔板數(shù)可以由色譜儀工作站直接讀出，一般離子色譜柱的柱效大于1000個(gè)塔板數(shù).

　　柱效下降會(huì)有什么現(xiàn)象?

　　1.看峰分離度，分離度直接關(guān)系測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確性，可以判斷柱效是否下降，柱效下降分離度一般會(huì)變差。

　　2.測(cè)定色譜柱的塔板數(shù)來(lái)判斷

　　3.通過(guò)壓力變化和出峰時(shí)間來(lái)判斷，一般柱效下降時(shí)伴隨著柱壓的升高和降低，此時(shí)出峰的時(shí)間也會(huì)和之前有很大差異。

　　4.還可以根據(jù)新的柱子的保留時(shí)間判斷,看重復(fù)性,平行性如何.

　　5.通過(guò)譜圖峰型的變化，是否有嚴(yán)重前伸和拖尾現(xiàn)象，如果峰型很差了，柱效已經(jīng)下降了

　　柱效下降后如何來(lái)提高柱效。

　　離子交換柱長(zhǎng)時(shí)間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,.用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽(yáng)離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生.另外,還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動(dòng)相做正方向和反方向沖洗.但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復(fù)到新柱的水平的.如果柱子裝反了,可以調(diào)回來(lái),但可能會(huì)造成柱內(nèi)擔(dān)體塌陷.在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。